提升1000倍!超灵敏埃博拉病毒检测法诞生,使用便捷且60分钟内可获结果

提升1000倍!超灵敏埃博拉病毒检测法诞生,使用便捷且60分钟内可获结果

杜克大学的一个跨学科科学家团队开发了一种高度敏感和快速诊断埃博拉病毒(EBOV)感染的检测方法。在感染了埃博拉病毒的猴子身上,这种被称为D4-assay的诊断方法被证明比目前批准的快速诊断测试的灵敏度高1000倍,并且能够比“金标准”聚合酶链反应(PCR)测试提前一天检测到病毒。

这项研究发表在4月7日的《科学转化医学》(Science Translational Medicine)杂志上。

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埃博拉病毒疾病的早期治疗和接触者追踪至关重要,原因有二:首先,患者一旦开始表现出症状,就具有高度传染性,早期诊断使接触者追踪和患者隔离更容易,有助于遏制EVD的传播。第二,如果不及时治疗或治疗较晚,EVD的致死率可高达90%,但如果患者在感染早期接受治疗,单克隆抗体的致死率可降至约10%。

目前检测埃博拉病毒的“金标准”是逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测试,它可以识别和放大病毒RNA,但它在EVD经常爆发的偏远地区难以实施。

为了解决前面两种检测方法的不足,杜克大学的研究小组采用了D4检测方法,这是一种超灵敏的医疗点诊断方法,此前由Ahsutosh Chilkoti实验室开发,用于快速准确地检测分泌糖蛋白(sGP),这是埃博拉病毒在感染早期产生的生物标志物。

埃博拉D4试验是通过喷墨打印这两种针对分泌糖蛋白的抗体到玻片上:检测抗体,用荧光标记,捕获抗体,准备与目标抗原结合。当一滴血或咽拭子或鼻拭子放在载玻片上时,检测抗体从阵列分离并与样本中的目标结合。这些抗体-生物标记复合物附着在载玻片上的捕获抗体上,发光表示捕获。

为了进一步提高灵敏度,D4检测被打印在Chilkoti实验室开发的一种隐形聚合物刷涂层上,可以防止非目标蛋白附着在载玻片表面。这消除了芯片上的任何“背景噪音”,使它更容易检测极低水平的目标蛋白,这使得D4检测非常灵敏。

与此同时,Chilkoti实验室还开发了一种廉价但高灵敏度的手持检测器——D4Scope——来读取D4分析结果。

他们的目标是继续完善他们的平台,将结果的时间从60分钟缩短到30分钟。使用分子进化的实验正在进行中,以增加捕获和检测抗体的敏感性。

译/前瞻经济学人APP资讯组

参考来源:https://www.eurekalert.org/pub_releases/2021-04/du-urd040521.php

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